Mantenimiento y titulación del virus de dengue para obtención de antígeno viral
Resumen
El método de diagnóstico más utilizado es el serológico, específicamente, la detección de anticuerpos IgM anti-dengue. Los antígenos virales utilizados en este método pueden ser preparados en cultivo de células de Aedes albopictus (C6/36). El objetivo de este trabajo fue el mantenimiento de los cuatro serotipos virales [D1 (RIO), D2 (RIO), D3 (H-87), D4 (BV)] en células C6/36 para la futura preparación de antígenos virales. Las células C6/36 fueron cultivadas en medio L-15 con 10% de SFB a 28 ºC, e infectadas con 50 μl de cada uno de los serotipos virales por 5 a 7 días. Una vez confirmada la infección por inmunoflurescencia indirecta, los virus fueron titulados por la técnica de placa de lisis. Los títulos de los serotipos fueron D1 (RIO) [2,9 x 106 PFU/ml], D2 (RIO) [4,4 x107 PFU/ml], D3 (H87) [6,4 x 107 PFU/ml] y D4 (BV) [5,1 x106 PFU/ml]. La producción de antígenos virales es de gran importancia dado que los mismos pueden ser utilizados en diversos métodos diagnósticos.
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Siler A, Lanciotti RS, Calisher CH, Gubler DJ, Chang GJ, Vorndam AV. Rapid detection and typing of dengue viruses from clinical samples by using reverse transcriptase-polymerase chain reaction. J Clin Microbiol 1992;30(3): 545-51.
Kimura R, Hotta S. On the inoculation of dengue virus into mice. Nippon Igaku 1994; 3379: 629-33.
Rigau-Pérez JG. The early use of break-bone fever (quebranta huesos, 1771) and dengue (1801) in Spanish. Am. J. Trop. Med. Hyg 1998; 59(2): 272–4.
Fonseca BAL, Gomes-Ruiz AC, de Paula SO, Nascimento RT. SYBR green and TaqMan real-time PCR assays are equivalent for the diagnosis of dengue virus type 3 infections. J Med Virol 2006; 78:760–63
Poersch CO, Pavoni DP, Queiroz MH, Borba L, Goldenberg S, Santos CND, et al. Dengue virus infections: comparison of methods for diagnosing the acute disease. J Clin Virol 2005; 32: 272–77
Innis BL. Dengue and dengue haemorrhagic fever. In Porterfield JS eds. Exotic viral infection. London: Chapman and Hall; 1995. P.103-46.
Guzmán MG, Kourí G. Advances in dengue diagnosis. Clin Diagnostic Lab Immunol 1996;3(6):621-7.
Marianneau P, Megret F, Olivier R, Morens D, Deubel V. Dengue1 virus binding to human hepatoma HepG2 and simian Vero cell surface differs. J.Gen Virol 1996;77:2547-54.
Anderson R, King AD, Innis BL. Correlation of E protein binding with cell susceptibility to dengue 4 virus infection. J Gen Virol 1992; 73:2155-9.
Després P, Frenkiel MP, Deubel V. Differences between cell membrane fusion activities of two dengue type 1 isolates reflect modifications of viral structure. Virology 1993; 196:209-19.
Guirakhoo F, Heinz FX, Mandl CW, Holzman H, Kunz C. Fusion activity of flavivirus: Comparison of mature and immature (prM- containing) tick borne encephalitis virions. J Gen Virol 1991;72:1323-9.
WHO. Dengue, dengue hemorrhagic fever and dengue shock syndrome in the context of the integrated management of childhood illness; Washington: World Health Organization; 2005.
Díaz FJ, Black WC 4th, Farfán-Ale JA, Loroño-Pino MA, Olson KE, Beaty BJ. Dengue Virus Circulation and Evolution in Mexico: A Phylogenetic Perspectiva. Arch Med Res. 2006; 37(6):760-73
Pozzoli L, Guillén Y, Franco L, Russomando G, Nara E, Candia N et al. Niños de 1 a 5 años de edad susceptible a adquirir dengue hemorrágico en localidades rurales del paraguay. Estudio preliminar. Archivo de Alergia e Inmunologia Clínica 2002; 33(2): 76.
MSPBS. Boletín epidemiológico semanal. 2006; 4(14):1
Uhl JR, Cocckerill FRI. The fluorescence resonance energy transfer system. In: Persing DH, Tenover FC, Versalovic J, Tang YW, Unger ER, Relman DA (ed). Molecular microbiology diagnostic principles and practice. Washington DC: ASMpress; 2004. p. 295–306.
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